分散酶Dispase II
- 起訂量 (瓶)價(jià)格
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1-10￥2600 /瓶
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≥10￥680 /瓶
- 發(fā)布日期： 2020-12-25
- 更新日期： 2026-04-28
產(chǎn)品詳請
| 產(chǎn)地 |
國產(chǎn)
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| 品牌 |
聯(lián)祖
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| 貨號 |
LZ-PYJ4995
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| 用途 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
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| 包裝規(guī)格 |
100mg
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| CAS編號 |
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| 純度 |
%
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| 是否進(jìn)口 |
否
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產(chǎn)品名稱：分散酶Dispase II
貨號：LZ-PYJ4995
規(guī)格 100 mg / 1 g
比活性（Specific Activity） ≥0.8 U/mg (+37℃, casein as substrate, pH 7.5)
單位定義（Unit Definition） 在溫度37℃、pH值為7.5的條件下，每分鐘水解酪蛋白釋放出相當(dāng)于1 μM(181 μg)酪氨酸的福林陽性氨基酸和肽所需要的酶量，即為一個(gè)蛋白酶活性單位，以U表示。
pH（pH Optimum） 6.0-8.5
抑制劑（Inhibitors） EDTA, EGTA, Hg2+, 其他金屬離子。血清不會抑制dispase活性。
激活劑（Activator） Ca2+，Mg2+，Mn2+，F(xiàn)e2+，F(xiàn)e3+，Al3+。的Ca2+濃度為2 mM。本酶制品已含足量的Ca2+使其處于活性。
產(chǎn)品特性
1） EC NO：3.4.24.4
2） 同義名：Neutral protease中性蛋白mei
3） 比活力：≥0.8 U/mg protein (37℃, casein as substrate, pH 7.5)
4） 酶活力單位定義：在37℃，pH 7.5的反應(yīng)條件下，1min內(nèi)釋放福林酚陽性反應(yīng)氨基酸和多肽量相當(dāng)于1 μmol (181 μg)酪氨suan所需的酶量即為一個(gè)活力單位。
5） pH：6.0 - 8.5
6） 激活劑：Ca2+為2mM，該酶已含足量Ca2+確保酶活力。
7） 抑制劑： EDTA, EGTA, Hg2+,以及其他重金屬。該酶活性不受血清干擾
使用方法
一、儲存液和工作液制備
1）儲存液制備：用Hepe緩沖鹽溶液（50 mM Hepes/KOH pH7.4, 150 mM NaCl）溶解Dispase II凍干粉，配制成10mg/ml的儲存液，用0.22μM濾膜過濾除菌。本儲存液置于2-8℃，2周穩(wěn)定；根據(jù)單次用量分裝凍存，高達(dá)2個(gè)月穩(wěn)定，避免反復(fù)凍融。
2）工作液制備：使用時(shí)用合適的細(xì)胞培養(yǎng)液將儲存液稀釋到工作液濃度即可，常用工作濃度為0.6-2.4 U/ml。不推薦使用>2.4 U/ml的工作濃度。具體使用濃度請根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系或參考文獻(xiàn)來調(diào)整。
組織分離
1）用無菌手術(shù)刀或剪刀將組織切成3-4mm小片，之后用無菌PBS緩沖液清洗組織片幾次；
2）用Dispase II工作液（0.6-2.4 U/ml）浸沒并37℃孵育進(jìn)行組織解離；
3）置于水平搖床上，低速轉(zhuǎn)動(dòng)，37℃孵育直至組織完quan解離；【注意】：次使用Dispase II，通過細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定總反應(yīng)時(shí)間。對于堅(jiān)硬致密組織需要1h的孵育時(shí)間，不過孵育時(shí)間幾小時(shí)也不會有副作用。
4）若有需要，將消化產(chǎn)物用無菌不銹鋼網(wǎng)過篩，從而分離解散細(xì)胞和殘留組織，或當(dāng)更大片段組織靜置到管底，輕輕倒出上層細(xì)胞。若需要進(jìn)一步解離，則加入新鮮的Dispase II工作液到殘留組織。
5）低速離心收集細(xì)胞，吸掉酶工作液；
6）用適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，置于正常預(yù)優(yōu)化條件下培養(yǎng)。
